液相色譜原理
液相色譜原理是一種物理分離技術。
1、液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
2、經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的,使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復雜。
3、直到20世紀60年代.發展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器,克服了經典液相色譜的缺點,發展成高效液相色譜,也稱為高壓液相色譜。
4、液相色譜按其分離機理,可分為四種類型,分別是吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法。
5、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。
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